BTX ECM 399電穿孔儀

適用于動植物、細(xì)菌、酵母、哺乳動物、人類細(xì)胞（包括活體細(xì)胞）的轉(zhuǎn)基因等操作，操作方法可參照相關(guān)文獻(xiàn)，及向廠商索要。ECM399轉(zhuǎn)基因儀主要用于哺乳動物轉(zhuǎn)染、細(xì)菌酶轉(zhuǎn)化，具有脈沖長、磁場強(qiáng)為其特點(diǎn)。

BTX ECM 399電穿孔儀應(yīng)用舉例

高壓型用于：DNA或誘變等大腸桿菌結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)基因
低壓型用于轉(zhuǎn)染、淋巴、髓膠質(zhì)成纖維和COS-7細(xì)胞
無論任何一種哺乳動物細(xì)胞均可選擇不同的電壓和脈沖范圍，并且脈沖可隨時(shí)調(diào)整

細(xì)菌/酵母轉(zhuǎn)化（系統(tǒng)：ECM399/630）
電穿孔現(xiàn)在被認(rèn)作是轉(zhuǎn)化細(xì)菌及酵母的有效的方法。革蘭氏陰性細(xì)菌（例如大腸桿菌）一般比革蘭氏陽性細(xì)菌更容易轉(zhuǎn)化，因?yàn)樗麄兊募?xì)胞壁組成不同。對于革蘭氏陰性細(xì)菌常常可以獲得10的10次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA的轉(zhuǎn)化效率，而對于革蘭氏陽性細(xì)菌，一般可以得到10的6次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA。Chang等人（1997）成功對一個(gè)mtz-敏感的Heliobacterpylori菌株進(jìn)行電穿孔以傳遞mtz抵抗性。Planelles等人（1999）使用電穿孔轉(zhuǎn)化大腸桿菌，以避免使用包裝物質(zhì)。近電穿孔儀器方面的進(jìn)展將使研究人員能夠進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)菌轉(zhuǎn)化（例如脈沖長度產(chǎn)生方面擴(kuò)展的功能條件）。

RNA、DNA、蛋白質(zhì)以及小分子都已經(jīng)通過電穿孔的方法轉(zhuǎn)入酵母。沒有必要在電穿孔前部分去除酵母細(xì)胞壁，因?yàn)樵谕暾湍鸽姶┛追矫娴倪M(jìn)展可以產(chǎn)生高的轉(zhuǎn)化率。Faber等人（1994）年優(yōu)化了S.Cerevisiae的實(shí)驗(yàn)方案，使用HansenulaPolymorpha獲得了比以前的報(bào)告增加300倍的轉(zhuǎn)化效率。

在質(zhì)粒修復(fù)中，質(zhì)粒從酵母轉(zhuǎn)入大腸桿菌以進(jìn)行詳細(xì)的DNA序列分析，這是另外一種重要的技術(shù)。這種兩個(gè)步驟的過程被電穿孔進(jìn)行了簡化，用于驗(yàn)證隱性基因的結(jié)構(gòu)，將其導(dǎo)入酵母，看基因性和表現(xiàn)性之間的關(guān)系。已經(jīng)建立了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方案使用指數(shù)衰減波發(fā)生器例如BTXECM630轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實(shí)驗(yàn)方案，例如BTXECM830，來轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。研究人員還成功將大的質(zhì)粒（BAC及YAC）導(dǎo)入細(xì)菌。電穿孔杯是細(xì)胞及酵母電穿孔的常用附件，而Model747共軸電極使用則變得越來越普遍。

BTX ECM 399電穿孔儀技術(shù)參數(shù)